细胞计数及活力检测染液
H1004-10ML
描述:细胞计数是细胞培养、细胞收取、及后续实验的常用技术。细胞计数染液含台盼兰 trypan blue染液,是最常用的细胞计数溶液。该染液细胞计数原理和方法与临床血细胞计数相同,即时可用,使用方便。同时,该染液对死细胞着色,活细胞不着色,从而可以区分死细胞与活细胞,计数的同时可初步检测细胞活力,判断分离、消化、复苏过程中细胞的损伤作用。使用时将细胞计数染液与细胞悬液1:1混合,滴加于细胞计数板,显微镜下计数即可。
规格:10 ml
储存:4ºC或室温24个月
所需物品:普通显微镜、血细胞计数板、盖玻片、计数器
细胞计数及活力检测
1. 吸出50µl细胞悬液,与等体积的细胞计数及活力检测染液混合,室温2-3分钟。
2. 将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。吸出少许与细胞计数染液混合后的细胞悬液,滴加在盖片边缘。悬液应充满盖片和计数板之间。
3. 显微镜镜下观察,用手动计数器计数。检查计数板四大格细胞总数,压在线上或线边缘的细胞只计左侧和上方的细胞。
4. 计数后按下式计算:初始细胞悬液中每毫升细胞数总数(ml)=稀释倍数×10000×四大格细胞总数/ 4。由于是1:1稀释,稀释倍数为2。
5. 检查细胞活力时,镜下取4个大格或任意视野,分别计死细胞和活细胞数,计算死细胞数与活细胞数的百分比。镜下死细胞被染为兰色,活细胞不被染色呈无色透明状。
说明
1. 镜下由两个以上细胞组成的细胞团应按单个细胞计算,若细胞团占10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
|