1 拟南芥的种植
试剂配制
人工土：3份蛭石，1份珍珠岩和1份黑土混合
PNS营养液：
每升含
5ml 1M KNO3，
2ml 1M Ca(NO3)2˙4H2O，
2ml 1M MgSO4˙7H2O，
2.5ml 20mM Fe.EDTA，
2.5ml 1M磷酸缓冲液（pH5.5），
1ml MS 微量元素 。
PNS营养液母液配方
①1M KNO3 101.1g
②1M Ca(NO3)2˙4H2O 236.15 g
③1M MgSO4˙7H2O，246.48 g
④20mM Fe.EDTA：
FeSO4 5.57g
EDTA 7.45g
注意先各自配成溶液，在混合。
⑤1M磷酸缓冲液（pH5.5）：
磷酸二氢钾 130.4g
磷酸氢二钾 9.12g
⑥MS 微量元素
硼酸 0.434g
硫酸锰（MnSO4 H2O） 1.7626g
CuSO4˙H2O 0.0798g
ZnSO4˙7H2O 0.172g
NaMoO4˙2H2O 0.0432g
NaCl 0.585g
CoCl˙6H2O 0.00129g
以上母液均配至1L
种植步骤
将春化过的拟南芥种子种于浇过饱和PNS营养液的人工土中，并用保鲜膜罩上。两天后光照，三天后揭膜。
人工培养室条件：相对湿度80%，恒温20-240C，光照强度80-200umol/M2/S，光照周期为8 h黑暗﹑16 h光照培养。
2 拟南芥的转化
试剂配制
渗透培养基（一升中）：1/2xMurashige-Skoog；5% 蔗糖；0.5克 MES；用KOH调至pH5.7；再加：10微升1mg/ml的6-BA 母液；200微升Silwet L-77）
注意：6-BA 母液配制时用乙醇溶解。1/2xMurashige-Skoog是用MS的基本组分配制，但大量元素减半。
另：经转化的拟南芥，种子收获后需在相应的抗性平板上筛选转化子
转化步骤
(1) 制备好已转化了相应质粒的农杆菌菌液10ml，在转化前一天晚上，转入大瓶培养过夜，第二天取出使用时农杆菌液O.D600当在1.2到1.6之间。
(2) 室温5000rpm离心15分钟。
(3) 弃上清，将农杆菌沉淀悬浮于相应体积的渗透培养基里，使O.D600在0.8左右。
(4) 将农杆菌悬浮液直接喷洒至整个植株（或用抽真空的方法），盖上透明的塑料盖子或保鲜膜以保持湿度，移入恒温室避光培养，第二天可开盖，正常光照培养。
(5) 一周后再喷洒一次，方法同上。
3 转化子的筛选
(1) 种子消毒：先用70%乙醇浸泡10分钟，在上述处理时要不时地使种子悬浮；然后用无菌水洗四次，在这步处理时最好也不时地使种子悬浮。
注意：用乙醇浸泡的时间不宜过长！
(2) 处理后的种子用Top agar（0.1%琼脂水溶液）均匀涂布在固体筛选培养基表面。一块150mm直径的平皿最多种1500棵。
(3) 4℃春化2到3天，移入22℃恒温室培养。
(4) 观察种子在固体筛选培养基上生长情况,可确定为转化子时,将转化子移栽至浇过饱和PNS营养液的人工土壤培养。
