科达宏伟 | W1009 | 总胆固醇(组织/细胞)酶法测定

总胆固醇(组织/细胞)酶法测定 W1009 105 assays 描述：在实体组织和细胞内，胆固醇酯既是构成细胞质膜的成分，也是细胞内脂滴的主要组分。细胞内胆固醇过度聚集与动脉粥样硬化泡沫细胞形成密切相关。实体组织和细胞的胆固醇测定远比与血液胆固醇测定复杂。试剂盒避免了有毒的有机溶剂抽提、繁杂的氮气吹干和脂质复溶等步骤，采用高效能试剂裂解细胞和提取胆固醇，优化酶学反应和操作步骤。简单易行，灵敏度高，线性范围20~5000 µmol/L。 原理：采用WHO、中国《全国临床检验操作规程》推荐的酶学方法，结合经典GPO Trinder酶学反应1：(1) 胆固醇酯酶分解胆固醇酯为游离胆固醇。(2) 胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化。(3) 反应过程产生过氧化氢。(4) 在过氧化物酶催化下进行生色反应，在550nm有最大吸收峰，光密度值与胆固醇浓度成正比。 适于测定样品 (1) 动物实体组织 (2) 培养细胞 (3) 细胞膜组分 血液、培养基胆固醇测定请使用W1008和W1008-2 组成 (105次微板测定或30次1 ml比色杯测定) (1) 裂解液 100 ml (2) R1试剂 16 ml (3) R2试剂 4 ml (4) 5 mmol/L胆固醇标准品0.5 ml 4 ºC避光储存3月。 所需设备：酶标仪、生化分析仪或721、722型可见光分光光度计。96孔微板或比色杯光径1cm。最佳工作波长550nm，如无此波长建议优先选用570nm、次选530、490nm。